叶律素

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TUhjnbcbe - 2024/8/29 18:21:00
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叶绿色(Chlorophyll)检测试剂盒(微板法)

产品货号:BA

产品规格:50T/T

产品简介:

叶绿体是光合作用的细胞器,在光合作用研究中,常需要用提取的叶绿体展开下游研究工作。叶绿体中所含的色素主要有两大类,叶绿素(包括叶绿素a和叶绿素b)和类胡萝卜素(包括胡萝卜素和叶黄素),它们与类囊体膜上的蛋白质结合,成为色素蛋白复合体,其中叶绿素又称叶绿体色素(Chlorophyll)。

叶绿素(Chlorophyll)检测试剂盒(微板法)检测原理是叶绿素不溶解于水,而溶于有机溶剂,以有机溶剂粗提叶绿素,根据朗伯-比尔定律,某有色溶液的吸光度(A)与其中溶质浓度(C)和液层厚度(L)成正比,即A=αCL,其中α为比例常数,当溶液浓度以百分比浓度为单位,层液厚度为1cm时,α为该物质的吸光系数。在本试剂盒情况下,叶绿素a和叶绿素b在有最大吸收波,根据经验公式可计算出叶绿素a、叶绿素b及总叶绿素含量。该试剂盒主要用于植物组织中叶绿素的提取以及定量检测叶绿素a、叶绿素b及总叶绿素含量。该试剂仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。

产品组成:

自备材料:

1.研钵或匀浆器

2.离心管

3.滤纸或纱布

4.96孔板

5.酶标仪

操作步骤:

1.叶绿素提取:

①取菠菜或其他植物新鲜叶片,洗净,擦干,去中脉,称取剪碎的新鲜样品0.1g,置于研钵或匀浆器,加入少量提取粉剂(约50mg)和1mlChlorophyllAssaybuffer,研磨或匀浆成液态。

②将研磨液或匀浆液转移离心管,用少量叶绿素提取液冲洗研钵或匀浆器数次,最后连残渣一同倒入离心管,补加ChlorophyllAssaybuffer,混匀,避光放置。

③观察底部组织残渣接近于白色,即为提取完全,如果仍有较多组织颜色,应再加入ChlorophyllAssaybuffer继续避光放置。

④滤纸或三层纱布过滤,留取滤液,即为叶绿素粗提液。

2.测定:取叶绿素粗提液加入96孔板的孔中,以酶标仪,以ChlorophyllAssaybuffer调零,测定粗提液在处吸光度(A、A)。

计算:

叶绿素a含量(mg/g)=Ca×S×V×N/(W×0)

叶绿素b含量(mg/g)=Cb×S×V×N/(W×0)

总叶绿素含量(mg/g)=CT×S×V×N/(W×0)

式中:Ca=13.95×A-6.88×A

Cb=24.95×A-7.32×A

CT=6.63×A-18.07×A

S=检测溶液的试剂高度(ml),可通过测量或计算获得。

V=叶绿素粗提液体积(ml)=10(ml)

N=稀释倍数

W=样品鲜重或干重(g)

注意事项:

1.为了避免叶绿素见光分解,操作时应尽量避光,研磨或匀浆时应尽量缩短时间。

2.测定吸光度值大于1时,可适当稀释后再进行测定。

3.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性口罩。

保存条件:12个月有效。

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