1、斐林试剂与双缩脲试剂
(1)两种试剂的相同点:都含有NaOH(氢氧化钠)和CuSO(硫酸铜)两种成分,NaOH溶液的质量浓度同为0.1g/ml
(2)两种试剂的不同点:
①原理不同:斐林试剂的实质是新配制的Cu(OH)(氢氧化铜)胶体溶液,双缩脲试剂的实质是碱性条件下中含有游离铜离子(Cu)的溶液
②使用方法不同:检测还原糖时将甲、乙两液等量混匀后立即使用;检测蛋白质时先加A液1ml摇匀,再加B液四滴,振荡
③CuSO溶液的浓度不同:斐林试剂中质量浓度为0.05g/ml,双缩脲试剂中质量浓度为0.01g/ml
2、实验注意点
(1)选材:不宜选有颜色的材料,因为会干扰实验结果
(2)材料处理:脂肪检测时,用浓度为50%的酒精洗去浮色,不能用清水,染料溶于有机溶剂,不溶于水
3、还原糖检测
(1)需要将装有生物组织的试管隔水加热,不能直接用酒精灯加热,如果不加热,则无法产生红色沉淀(金属铜),如果有机物为非还原糖,则加热后溶液仍为浅蓝色,而非无色。
(2)还原糖种类:
①常见的单糖:葡萄糖,果糖,半乳糖,核糖,脱氧核糖
②二糖:麦芽糖,乳糖
(3)非还原糖:蔗糖和淀粉、糖原、纤维素等多糖
4、需要用到无色材料的实验:
①还原糖、脂肪、蛋白质的检测
②观察DNA和RNA在细胞中的分布
③观察线粒体
④观察细胞的有丝分裂
⑤观察细胞的减数分裂
⑥低温诱导染色体加倍
5、需要用到有色材料的实验
①观察植物细胞的质壁分离和复原
②观察叶绿体
③叶绿素的提取和分离